Proponemos abordar vulnerabilidades epigenéticas específicas asociadas con mutaciones de la histona H3. Estas alteraciones no solo afectan la organización y el crecimiento del tejido, sino que convierten a H3 en una oncohistona capaz de impulsar la tumorigénesis de DMG.

La oncohistona H3 modifica la arquitectura de la cromatina y provoca cambios en el proteoma unido a cromatina de la célula cancerosa, contribuyendo al mantenimiento del fenotipo tumoral. A diferencia de la radioterapia, que generalmente daña el ADN del tejido canceroso, nuestro enfoque se centra en eventos moleculares específicos que generan DMG.

Nuestra hipótesis es que nuevos compuestos frente a un objetivo específico prioritario, solos o en combinación con otros fármacos, pueden explotarse con fines terapéuticos contra DMG mediante cribado de alto rendimiento y validación preclínica.

HTS para identificar nuevos inhibidores

Nos asociaremos con la Drug Screening Platform (DSP) del Institut de Recerca Biomèdica (IRB) Barcelona, que dispone de una biblioteca de 130.000 compuestos. El IRB y el CRG mantienen un acuerdo de colaboración establecido.

Se utilizará un ensayo HTS basado en TR-FRET para medir interacciones entre proteínas en presencia de inhibidores. Para ello se emplearán dominios del objetivo de interés fusionados a etiqueta GST (producidos en Escherichia coli) y péptidos de colas H3/H4 acetiladas disponibles comercialmente.

Los candidatos preseleccionados se evaluarán mediante acoplamiento in silico y posterior validación con ensayo de unión por resonancia de plasmón superficial (SPR).

Validación en BO y modelos ortotópicos DMG-PDX

Emplearemos la plataforma de organoides cerebrales (BOs) para evaluar efectividad y seguridad de los compuestos identificados en el Objetivo 1. Tras la exposición terapéutica, mediremos la eliminación de células DMG con ensayos celulares y moleculares.

También se analizarán combinaciones con inhibidores de EZH2 o DNMT para potenciar una inhibición sinérgica con compuestos ya aprobados para otras indicaciones.

Los fármacos más prometedores se validarán finalmente en ratones PDX portadores de tumores DMG, utilizando sistema IVIS para rastrear presencia y crecimiento tumoral.